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葡聚糖凝膠G-15保存方法
點擊次數(shù):5618 更新時間:2018-01-26

上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)為您介紹葡聚糖凝膠G-15性能特點,保存方法,參數(shù)說明,使用方法及其他咨訊,本司所供應(yīng)的葡聚糖凝膠系列有很多,比如有:葡聚糖凝膠LH-20,葡聚糖凝膠LH-60,葡聚糖凝膠G-10,葡聚糖凝膠G-15,葡聚糖凝膠G-25,葡聚糖凝膠G-50,了解更多請來電!

 

中文名:葡聚糖凝膠G-15

中文別名:交聯(lián)葡聚糖凝膠G-15;交聯(lián)右旋糖酐凝膠G-15

英文名:Sephadex G-15

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

干顆粒直徑:40~120um

PH:2~13

床體積毫升/克干分子篩:2.5~3.5ml/g

分子量分級范圍:A.肽及球形蛋白質(zhì):100~1500;B. 葡聚糖(線性分子):100~1500

性狀:白色珠粒或粉末,屬親水性凝膠;性穩(wěn)定,不溶于水,弱酸和堿溶液,遇強酸能使糖甘鍵分解。

 葡聚糖凝膠G-15保存方法

葡聚糖凝膠G-15保存方法

1、未使用的葡聚糖凝膠G-15,室溫保存即可。

2、使用后保存方法如下:凝膠層析的載體不會與被分離的物質(zhì)發(fā)生任何作用,因此凝膠柱在層析分離后稍加平衡即可進行下一次的分離操作;但使用多次后,由于床體積變小,流動速率降低或雜質(zhì)污染等原因,使分離效果受到影響;此時對凝膠柱需進行再生處理,其方法是:先用水反復(fù)進行逆向沖洗,再用緩沖溶液平衡,即可進行下一次分離;對使用過的凝膠,若短時間保存,只要反復(fù)洗滌除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì),加入適量防腐劑即可。

3、若長期保存,則需將凝膠從柱中取出,進行洗滌,脫水和干燥等處理后,裝瓶保存。

 

 葡聚糖凝膠G-15使用方法:

1、乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇,濾干。

2、無鹽水浸泡:室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時,間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹。

3、鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2N HCl浸泡12小時,間隙攪拌,濾干,水洗至中性。

4、將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層。

5、上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。

6、凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50cm 以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免;難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為5: 1 即可。

7、洗脫方法:可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。

8、在位清洗(CIP):凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白;方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向清洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

 

葡聚糖凝膠G-15說明:

葡聚糖凝膠G-15吸水率是1mL/g干膠,G型交聯(lián)葡聚糖凝膠,該凝膠是由直鏈的葡聚糖分子和交聯(lián)劑3-氯1,2-環(huán)氧丙烷(交聯(lián)劑)相互交聯(lián)而成的具有多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子化合物;凝膠顆粒中網(wǎng)孔的大小可通過調(diào)節(jié)葡聚糖和交聯(lián)劑的比例來控制,交聯(lián)度越大,網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)越緊密;交聯(lián)度越小,網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)就越疏松,網(wǎng)孔的大小決定了被分離物質(zhì)能夠自由出入凝膠內(nèi)部的分子量范圍;可分離的分子量范圍從幾百到幾十萬不等。

 

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