人四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒技術原理及其他咨訊由上海遠慕生物提供講述，本司的ELISA試劑盒有進口品牌及國產品牌供您選擇，種屬包含：大鼠，小鼠，人，猴，雞，鴨，魚，兔，狗，豬，植物，羊，豚鼠，駱駝及其他種屬等，品種齊全，價格實惠，歡迎訂購!
【信息說明】
中文名：人四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒
別名：人四氫生物蝶呤(BH4)ELISA Kit
供應商：上海遠慕
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。
用途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
【技術原理】
1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2、結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3、酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
4、受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。
5、此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6、加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平)，并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
【操作步驟】
1、加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測樣品10µl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
2、溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶標試劑50µl，空白孔除外。
6、顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘。
7、終止：每孔加終止液50µl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8、測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
【注意事項】
1、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
2、試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
3、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
4、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
5、洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7、加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8、按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
9、底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
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