上海遠慕生物詳細講述雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測試劑盒的相關(guān)咨訊，本司的EILSA試劑盒有進口及國產(chǎn)品牌供您選擇，種屬眾多，價格實惠，提供免費代測服務，全程提供實驗操作指導，種屬包含大鼠，小鼠，人，雞，兔，植物，駱駝，豚鼠，馬，猴，豬，狗及其他種屬等，歡迎訂購!
【信息說明】
中文名：雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒
中文別名：雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit
供應商：上海遠慕
規(guī)格：96T/48T
保質(zhì)期：6個月，所有試劑盒均提供新批次。
方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。
用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
【樣本要求】
1、血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2、血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3、尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4、細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5、組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6、標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7、不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
【性能優(yōu)點】
1、靈敏度高，檢測時間短，只需4小時
2、成本低，操作簡單
3、樣本多樣，血漿、尿液、細胞上清液等
4、檢測適用于多種不同動物物種
5、標準范圍廣，允許使用高濃度樣本
【操作步驟】
1、使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2、根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8、取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9、在450nm波長處測定各孔的OD值。
【注意事項】
1、試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2、實驗中不用的試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
3、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
4、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5、使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
6、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7、洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
8、底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
9、加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
10、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
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