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輻照后的血清對細胞培養(yǎng)實驗有影響嗎
點擊次數(shù):948 更新時間:2023-03-03

血清為細胞正常生長提供必要的營養(yǎng)成分,而血清也是很容易受到外界因素影響的,所以有些會對血清采取鈷60γ射線照射也就是我們所謂的輻照血清。那么血清被輻照后會對本身產(chǎn)品品質(zhì)影響嗎?下面遠慕為大家解惑。

輻照型血清是將正常血清經(jīng)過三次無菌過濾后再用鈷-60輻射滅菌制得的血清。輻照血清是細胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基,它具有促進細胞增殖和誘導細胞分化等的生物學功能其質(zhì)量的好壞直接影響著生物制品的安全性。

早在2004年之前,西北民族大學生命科學與工程學院的研究人員就用已知大腸桿菌噬菌體為陽性的同批新生牛血清進行過測試。他們選擇了一系列不同的輻照劑量,具體為4、8、12、18、24、28、32、40、44、48kGy(所用劑量率為4.37Gy/min),檢測了新生牛血清輻照前后的總蛋白含量,發(fā)現(xiàn)其總蛋白含量沒有顯著變化。他們又檢查了輻照前后的大腸桿菌噬菌體。發(fā)現(xiàn)在輻射劑量≥8kGy時,能wan全殺滅大腸桿菌噬菌體。

他們還檢測了輻照后血清的促細胞生長效應。他們把血清按10%比例添加到MEM中。在96孔板中,細胞培養(yǎng)接種濃度為1X104個/ml,每孔加0.2ml。結(jié)果發(fā)現(xiàn),輻照劑量<16kGy時,輻照后的新生牛血清和輻照前比,Vero細胞的最大增殖濃度無顯著性差異(P>0.05)。在輻照劑量<24kGy時,Vero細胞的倍增時間也無顯著性差異(P>0.05)。但輻照劑量>24kGy時,Vero細胞的倍增時間則明顯延長1。

血清功能:

1:提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。

2:提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3:是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。

4:起酸堿度緩沖液作用。

5:提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰yi蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。應用適用于正常封閉與增殖旺盛的常規(guī)細胞系的培養(yǎng)等。

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