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純化膠原蛋白的方法
點(diǎn)擊次數(shù):357 更新時(shí)間:2023-04-25

可用于膠原蛋白的純化方法包括鹽析法、透析法、離心法、電泳法和色譜法,其中鹽析法、離心法和電泳法最為常用。由于單一方法難以wan全分離純化膠原蛋白,實(shí)際操作都是通過(guò)復(fù)合法來(lái)達(dá)到分離純化膠原蛋白的目的。

鹽析法一般采用高濃度NaCl;

離心法常選用制備型低溫超速離心機(jī);

電泳法多采用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE),該法既可用于膠原蛋白的分離純化,還可用來(lái)測(cè)定膠原蛋白分子的相對(duì)分子質(zhì)量。

像有人用破碎、酶解、鹽析三步法提純蘇尼特羊骨骼I型膠原蛋白。先去除骨頭里的非膠原物質(zhì),然后往沉淀中10%的wei蛋白酶,在4℃的條件下消化24h,以14000r/min離心40min。棄沉淀往上清液中加NaCL,使它終濃度達(dá)到0.9moL/L,靜置過(guò)夜,再離心,最后的沉淀就是I型膠原蛋白。

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