RNA提取時(shí)RNA降解原因
點(diǎn)擊次數(shù)：472 更新時(shí)間：2022-03-04
1 ) 新鮮細(xì)胞：
裂解液的量不足，使得裂解不充分。
2 ) 新鮮組織：
某些含有內(nèi)源性核酸酶的樣品，很難避免RNA酶的降解，建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎，并且，勻漿時(shí)采用更多的裂解液。
3 ) 冷凍樣品：
樣品取材后應(yīng)該迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放。如果未經(jīng)液氮速冷直接轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放，會(huì)造成RNA緩慢降解。樣品研磨后，在液氮?jiǎng)倓倱]發(fā)完時(shí)，將樣品迅速轉(zhuǎn)移到含裂解液的容器中，立即混勻勻漿。
4 ) 外源 RNA 酶的污染：
試劑、器械等實(shí)驗(yàn)用品應(yīng)該采用DEPC 水滅菌處理。
5 ) 內(nèi)源 RNA 酶的污染：
抑制劑失效或者用量不夠，實(shí)驗(yàn)樣品過(guò)多或者勻漿溫度過(guò)高。
